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　　詳細分享一下SPE固相萃取的操作步驟

　　SPE固相萃取的過程要求樣品以溶液存在,沒有干擾,而且有足夠的濃度以能被檢測。

　　SPE固相萃取的五步操作步驟對于反相,正相,離子交換萃取過程,一般五步全部都是需要的對于樣品純化過程只需要前三步,步驟一和步驟二如描述的一樣,然而在第三步,分析物將隨著樣品從柱內流出被收集,干擾雜質則保留在填料上。

　　步:選擇合適的小柱1)如何選擇合適的SPE小柱或者膜片(注建議固相萃取膜片用于大體積樣品,含有大顆粒或處理時需要很高的流速的樣品)大小尺寸的選擇:a,SPE小柱選擇如果您的樣品使用小柱尺寸小于1ml 1ml1ml-250ml,不要求萃取流速3ml1ml-250ml,要求萃取流速 6ml10ml-250ml,高樣品容量10ml/35ml/60ml大于1L,不要求萃取流速10ml/35ml/60mlb,SPE膜片選擇如果您的樣品 使用膜片的尺寸100ml-1L47mm大于1L90mm2)填料量的選擇反相、正相和吸附類型的過程:

　　被萃取樣品的質量不超過柱內填料量的5%。換句話說,如果您用的100mg/1ml的SPE小柱,分析物的上樣質量不超過5mg。離子交換過程:您必須考慮離子交換容量:SAX和SCX的吸附容量約0.2meg/g(1meg=1mmole的+1或-1帶電荷物質)NH2和WCX填料的離子交換容量需要由具體的應用來決定。

　　第二步:活化平衡SPE小柱萃取樣品之前,活化平衡固相萃取填料,用一滿管溶劑沖洗填料,對于膜片則用5-10mla,反相鍵合硅膠和極性吸附介質,通常用與水互溶的有機溶劑如甲醇活化,然后用水活緩沖溶液平衡。

　　b,正相類型固相萃取硅膠和極性吸附介質通常用樣品所在的有機溶劑來預處理。

　　c,離子交換填料用于非極性有機溶劑中的樣品時,采用樣品溶劑來預處理。對于極性溶劑中的樣品,用水溶性有機溶劑來活化,在用一定的PH,有機溶劑含量和鹽濃度的水溶液平衡。

　　第三步:上樣用移液管或者微量吸液管準確的將樣品轉移到小柱或貯液瓶中,樣品必須以匹配固相萃取的形式存在。

　　第四步:淋洗填料如果您的目標物被保留在填料上,使用與溶解樣品相同的溶液,或另外一種不能洗脫目標化合物的溶液,去沖洗掉未保留的或不需要的物質。通常沖洗溶液不超過一個柱體積,固相萃取膜片需要5-10ml。

　　第五步:洗脫目標物用少量能洗脫目標化合物的溶液(一般200微升-2ml,取決于柱管的大小,或者5ml-10ml,取決于膜片的大小)去清洗填料,但是要留下在清洗時未洗下的雜質。收集洗脫液為進一步的分析做準備。